導(dǎo)語(yǔ)：紫丁香葉中總皂苷提取論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1儀器與材料

日本島津紫外分光光度計(jì)UV-2401PC（北京）；電子天平MettlerCE240(上海)；試劑均為分析純；齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品（供含量測(cè)定用）購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所；紫丁香葉為200609采摘的新鮮葉(由長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)鄧明魯教授鑒定)，干燥備用。

2方法與結(jié)果

2.1紫丁香葉總皂苷的不同提取方法

2.1.1水煎法

取干燥的紫丁香葉100g，加水文火煎煮3次。第1次12倍量水煎2h，后2次加10倍量水，煎1.5h，合并3次提取液，過(guò)濾，濃縮，80℃減壓干燥，稱重。同法做3次平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算平均得膏率。得膏率(%)=干膏重/生藥量×100%。

2.1.2醇提法

傳統(tǒng)的提取總皂苷的方法為乙醇提取，因此本實(shí)驗(yàn)選用70%乙醇回流提取。取干燥的紫丁香葉100g，用70%乙醇回流提取3次，1.5h/次，加醇量分別為12，10，8倍量。合并提取液，過(guò)濾，濃縮80℃，減壓干燥，稱重。同做3次平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算平均得膏率。

2.1.3超聲波法

取兩份干燥的紫丁香葉100g，分別加10倍量水和70%乙醇超聲3次，30～40min/次，合并提取液，過(guò)濾，濃縮，減壓干燥，稱重。同法做3次平行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算平均得膏率。

2.2紫丁香葉總皂苷含量測(cè)定方法

2.2.1對(duì)照品溶液的制備

以齊墩果酸作為標(biāo)準(zhǔn)品，精密稱取干燥至恒重的齊墩果酸對(duì)照品11.04mg置于25ml容量瓶中，加甲醇5ml超聲處理5min，用甲醇定容至刻度，搖勻得濃度為0.44mg/ml的對(duì)照品儲(chǔ)備液。

2.2.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

精密吸取齊墩果酸對(duì)照品溶液0.05ml及供試品溶液1ml于10ml具塞試管中，水浴揮干溶劑，精密加入新配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，加塞，搖勻，于60～65℃水浴中加熱15min，取出，流水冷卻至室溫后，精密加入醋酸乙酯5ml，搖勻，以相同試劑為空白，在450～900nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描。齊墩果酸對(duì)照品在553nm處有最大吸收，樣品溶液在546nm處有最大吸收（見(jiàn)圖1），但在550nm處也有強(qiáng)吸收，故選擇550nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取齊墩果酸對(duì)照品溶液(mg/ml)0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50ml分別加入6支具塞試管中，即各試管中標(biāo)準(zhǔn)品的量分別為0.022，0.044，0.088，0.132，0.176，0.220mg，按照“2.2.2”項(xiàng)下操作，按分光光度法［5］,于550nm處測(cè)定吸光度。得到吸光度與濃度的方程：A=8.3425C+0.0527,r=0.9995(n=6)。在22～220μg范圍內(nèi)齊墩果酸對(duì)照品顯色后的吸光度與濃度呈良好線性關(guān)系。

2.2.4供試品含量測(cè)定取“2.1”項(xiàng)下的5組干粉各2.5g，30ml甲醇溶解，稱重，超聲20min，補(bǔ)足損失的重量，搖勻過(guò)濾，取續(xù)濾液1ml甲醇定容到100ml，作為供試品溶液。取供試品溶液1ml于10ml具塞試管中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的操作方法測(cè)定樣品的吸光度。然后根據(jù)線性方程計(jì)算其總皂苷的含量。結(jié)果見(jiàn)表1。表1紫丁香葉中總皂苷不同提取方法含量比較（略）

2.3正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選紫丁香葉總皂苷醇提工藝通過(guò)表1可以看出，不同提取方法直接影響著紫丁香葉總皂苷的測(cè)定結(jié)果，雖然超聲波提取法是近幾年發(fā)展起來(lái)的提取方法，節(jié)省時(shí)間，而且溶劑用量少，但該法出膏率低，提取得到的總皂苷含量較低，不宜采用。綜合考慮，70%乙醇提取總皂苷是比較合適的提取方法。為此，設(shè)計(jì)醇提正交，以進(jìn)一步優(yōu)化醇提工藝。

2.3.1因素水平的確定根據(jù)實(shí)際情況，選擇提取次數(shù)（A），提取時(shí)間（B），溶媒量（C），醇濃度（D）4個(gè)考察因素，每個(gè)因素各設(shè)置3個(gè)水平。因素水平見(jiàn)表2。

2.3.2實(shí)驗(yàn)方法及指標(biāo)考察取紫丁香葉100g，按L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)。共9組實(shí)驗(yàn)，每組兩次平行實(shí)驗(yàn)，以總皂苷含量為指標(biāo)，測(cè)定結(jié)果取其平均值。結(jié)果見(jiàn)表3，方差分析見(jiàn)表4。表2醇提因素水平（略）表3正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）

3討論

目前《中國(guó)藥典》尚未收錄紫丁香葉，而且尚未見(jiàn)國(guó)內(nèi)有關(guān)于紫丁香葉總皂苷含量的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)中選用皂苷類比較常見(jiàn)的母核結(jié)構(gòu)——齊墩果酸為對(duì)照品，對(duì)總皂苷的含量進(jìn)行測(cè)定，不失為一種較好的選擇。

在提取時(shí)間因素的水平選擇上，提取時(shí)間太長(zhǎng)，成本高，不利于生產(chǎn)，時(shí)間短提取不完全。因此選擇了1.0，1.5，2.0h3個(gè)提取水平；溶媒用量根據(jù)實(shí)際的浸漬情況，選擇12，13，14倍量3個(gè)水平；同時(shí)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明50%以下醇提所得總皂苷含量較低，因此選擇50%，70%，90%3種醇濃度水平。表4方差分析（略）

由表3的直觀分析結(jié)果可知，優(yōu)選出的提取工藝為A2>C2>D3>B2。由表4的方差結(jié)果分析可知，A，C因素對(duì)醇提工藝均有顯著影響，D因素對(duì)醇提有影響，而B(niǎo)因素對(duì)結(jié)果沒(méi)有影響。因此，為節(jié)省能源，選擇提取1.0h。即最佳提取工藝為A2B1C2D2，即以70%乙醇回流提取2次，1h/次，加醇量為13倍量/次。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明，此提取工藝得到滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

【參考文獻(xiàn)】

［1］孫傳奇．遼寧省中藥資源名錄［M］.沈陽(yáng)：遼寧省中藥資源普查辦公室，1987：46.

［2］Harbome,J．B．AchemotaxonomicsurveyofflavoriodsinleavesoftheOleaceae［J］.Bot．J．Linn,soc,1980,8(2)：155.

【摘要】目的優(yōu)選紫丁香葉中總皂苷的提取工藝。方法采用香草醛－冰醋酸－高氯酸顯色法，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定不同提取方法下所得紫丁香葉藥材中總皂苷的含量，選出紫丁香葉總皂苷的提取工藝。進(jìn)而設(shè)定正交實(shí)驗(yàn)，來(lái)優(yōu)選最佳提取工藝。結(jié)果總皂苷的最佳提取工藝為70%乙醇回流提取2次，1h/次，加醇量為每次13倍量。結(jié)論此工藝安全、成本低，得到的總皂苷含量高，可作為提取紫丁香葉生產(chǎn)工藝參考。

【關(guān)鍵詞】紫丁香葉總皂苷正交設(shè)計(jì)提取工藝