導(dǎo)語：清腦降壓片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的建立清腦降壓片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜法鑒別制劑中當(dāng)歸、決明子；采用高效液相色譜法測(cè)定制劑中黃芩苷含量。結(jié)果當(dāng)歸、決明子薄層圖譜斑點(diǎn)清晰，空白無干擾；黃芩苷在0.076～1.52mg范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，回歸方程Y=52.585X-0.2942，r=0.9999，平均回收率為100.36%。RSD為1.67%（n=9）。結(jié)論所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速、穩(wěn)定、可靠，可作為該制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】清腦降壓片；薄層色譜法；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；黃芩苷

Abstract:ObjectiveToestablishthequalitystandardofQingnaoJiangyaTablet.MethodsToidentifyRadixAngelicaSinensisandSemenClssiaebyTLC.DeterminebaicalinbyHPLC.ResultsRadixAngelicaSinensisandSemenClssiaehadasharpchromatogrambyTLC.ThestandardcurveofbaicalinwasY=52.585X-0.2942，r=0.9999，linearrangewas0.076～1.52mg，averagerecoveryrateofbaicalinwas100.36%，RSDwas1.67%.ConclusionThemethodissimple，accurateandcanbeusedforthequalitycontrolofthegranules．

Keywords:QingnaoJiangya;Tablet；TLC；Qualitystandard；Baicalin

清腦降壓片的標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國藥典》2005年版，處方由黃芩、當(dāng)歸、決明子等13味中藥組成，具有平肝潛陽、清腦降壓的功效。用于肝陽上亢，血壓偏高，頭昏頭暈，失眠健忘等。目前《中國藥典》所記載的標(biāo)準(zhǔn)只對(duì)方中當(dāng)歸和決明子進(jìn)行薄層鑒別，尚未對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定［1］，清腦降壓片為臨床上降血壓的常用藥，且有較大的開發(fā)前景［2］，該藥品需要更確切的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行有效的控制。黃芩為本方要藥，黃芩苷為其活性成分，具有清熱瀉火、降壓止咳等作用，用于高熱煩渴、高血壓、肺熱咳嗽等疾病，與本品的功能主治有密切關(guān)系，是本制劑的主要有效成分之一。因此，本研究運(yùn)用TLC對(duì)制劑中的當(dāng)歸和決明子進(jìn)行定性檢測(cè)，并采用高效液相色譜法對(duì)制劑中黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與試藥

高效液相色譜儀∶DionexSummit(P680HPLCPump,ASI100AutomatedSampledInjector,UVD170U,STH585ColumnOven)Chromeleon數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，超聲波清洗機(jī)（SB-5200,寧波新芝科器研究所），實(shí)驗(yàn)室專用超純水機(jī)(重慶利迪現(xiàn)代水技術(shù)設(shè)備有限公司)。

甲醇為色譜純?cè)噭∕erck公司），水為超純水，其它試劑均為分析純。黃芩苷（批號(hào)∶110715200212）對(duì)照品均購自中國藥品生物制品檢定所。清腦降壓片(批號(hào)20041201，20041202，20041203)，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥研究開發(fā)中心提供；其它試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1薄層色譜鑒別

2.1.1當(dāng)歸的薄層鑒別取本品10片，研細(xì)，加正己烷20ml，超聲處理30min，濾過，濾液濃縮至0.5ml,作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.1g，加正己烷10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。按不含當(dāng)歸的處方，采用制劑工藝及上述供試品制備方法，制成缺當(dāng)歸陰性樣品溶液。按照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版Ⅰ部附錄ⅥB）試驗(yàn)，吸取供試品溶液5～10μl及對(duì)照藥材溶液1μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷醋酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；缺當(dāng)歸樣品溶液未見上述斑點(diǎn)。結(jié)果見圖1。

2.1.2決明子的薄層鑒別取本品10片，研細(xì),稱取粉末1.5g，加甲醇10ml，浸漬1h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加鹽酸1ml,置水浴上加熱30min，立即冷卻，用乙醚分2次提取，20ml/次,合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。另取決明子對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。另取大黃素、大黃酚對(duì)照品，加甲醇制成每毫升各含1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。按不含決明子的處方，采用制劑工藝及上述供試品制備方法，制成缺決明子的陰性樣品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以正己烷醋酸乙酯甲酸(10∶1∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色斑點(diǎn)；置氨蒸氣中熏后，斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。結(jié)果見圖2。

2.2黃芩苷的含量測(cè)定

2.2.1色譜條件色譜柱為KromasilC18(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相甲醇水磷酸（47∶53∶0.2）；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；流速1.0ml/min；柱溫25℃。

2.2.2線性關(guān)系考察精密稱取黃芩苷對(duì)照品3.8mg，置50ml容量瓶中，用70%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每毫升中含黃芩苷76μg）。分別精密吸取對(duì)照品溶液1，2，4，8，14，20μl進(jìn)行色譜測(cè)定，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以進(jìn)樣量（Y）對(duì)峰面積（X）進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果顯示，進(jìn)樣量在0.076～1.52mg范圍呈線性關(guān)系，回歸方程為Y=52.585X-0.2942，相關(guān)系數(shù)r=0.9999。

2.2.3專屬性考察分別精密吸取線性考察項(xiàng)下對(duì)照品溶液、清腦降壓片供試品溶液、清腦降壓片缺黃芩苷供試品溶液各10μl進(jìn)行色譜測(cè)定。色譜圖見圖3。結(jié)果顯示，在該色譜條件下，方中其他成分與黃芩苷分離良好，其他成分對(duì)黃芩苷含量測(cè)定無干擾。

圖1清腦降壓片中當(dāng)歸的TLC圖譜（略）

圖2清腦降壓片中決明子的TLC圖譜（略）

圖3清腦降壓片中黃芩苷的HPLC圖譜（略）

2.2.4提取方法的考察

提取方法的選擇：取同一批號(hào)（20041201）樣品3份各1.5g，精密稱定，各加入70%乙醇50ml，分別超聲提取30min，水浴回流3h，考察不同提取方法對(duì)提取結(jié)果的影響。結(jié)果見表1。結(jié)果顯示，由于回流提取方法的溫度較高，加熱時(shí)間長(zhǎng)，使黃芩苷水解，影響提取效果，超聲提取方法提取的黃芩苷含量較水浴回流提取的高，而且從操作簡(jiǎn)便角度考慮，確定提取方法為超聲提取。

提取時(shí)間的考察：取同一批號(hào)（20041201）樣品3份各1.5g，精密稱定，各加入70%乙醇50ml，超聲提取，提取時(shí)間分別為30，60，90min，后處理同供試品制備方法，考察超聲時(shí)間對(duì)提取效果的影響。結(jié)果見表2。結(jié)果顯示，樣品采用提取時(shí)間30，60，90min的各成分含量相差不大，從節(jié)省時(shí)間方面考慮，確定提取時(shí)間為30min。

表1不同提取方法試驗(yàn)結(jié)果（略）

表2不同提取時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果（略）

2.2.5供試品溶液制備方法取本品10片，研細(xì)，取1.5g,精密稱定，精密加入70%乙醇50ml，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液5ml，置10ml容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，搖勻，即得。

2.2.6精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取3.2項(xiàng)下對(duì)照品溶液4μl重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得峰面積積分值，平均值為32.24mg/g,RSD＝1.99%。

2.2.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密吸取3.5項(xiàng)下供試品溶液，分別在0，2，4，6，12h吸取10μl進(jìn)樣，測(cè)得峰面積積分值，平均值23.40%，RSD=1.27%。

2.2.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取清腦降壓片樣品（批號(hào)20041202），按照3.5項(xiàng)下供試品溶液制備方法操作，吸取10μl進(jìn)樣，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得峰面積積分值，外標(biāo)法計(jì)算含量，平均值為29.19mg/g，RSD=1.50%。

2.2.9加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已知含量的同一批樣品（批號(hào)20041202）0.5g，精密穩(wěn)定，精密加入一定濃度的黃芩苷對(duì)照品溶液（28mg·ml-1）0.8，1.0，1.2ml，依法制備供試品溶液，HPLC測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果表明，黃芩苷的平均回收率為100.36%，RSD為1.67%。結(jié)果見表3。

表3黃芩苷回收率測(cè)定結(jié)果（略）

2.2.10樣品含量測(cè)定取清腦降壓片樣品（批號(hào)20041201，20041202，20041203），按供試品溶液制備方法制備，吸取10μl進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，計(jì)算含量。結(jié)果見表4。

表4樣品含量測(cè)定結(jié)果（略）

3討論

本研究在查閱文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，對(duì)樣品制備中提取條件（提取方法［3］、提取時(shí)間［4］）進(jìn)行考查，其中較完善的提取方法為超聲提??；一方面說明了超聲提取技術(shù)作為一項(xiàng)比較先進(jìn)、方便的提取方法，特別適用于實(shí)驗(yàn)室研究。另一方面說明了本方法的耐用性和穩(wěn)定性，在長(zhǎng)時(shí)間提取中仍然不影響黃芩苷的含量。

該藥品為薄膜衣片，其處方中黃芩、當(dāng)歸、決明子是該藥品的重要組成，而《中國藥典》2005年版只對(duì)決明子做了薄層鑒別，因此，本研究在此基礎(chǔ)上再對(duì)當(dāng)歸進(jìn)行薄層鑒別，并采用HPLC對(duì)黃芩苷進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果顯示，該方法用于該品種有良好的檢測(cè)結(jié)果，HPLC對(duì)黃芩苷的響應(yīng)值靈敏；對(duì)當(dāng)歸薄層鑒別的研究成熟，實(shí)驗(yàn)結(jié)果理想；最后確定的方法穩(wěn)定、可行，可以為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供參考。

【參考文獻(xiàn)】

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