導(dǎo)語：如何才能寫好一篇化學(xué)洗滌的具體操作方法，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

一、蒸發(fā)結(jié)晶

高中化學(xué)人教版必修1課本第一章P5-6實(shí)驗(yàn)1-1介紹粗鹽提純，最后從食鹽水得到食鹽晶體，就是采用蒸發(fā)結(jié)晶的（初中化學(xué)實(shí)驗(yàn)也講過），因?yàn)镹aCl的溶解度隨溫度變化不大，其溶解度曲線圖中幾乎是一條直線（圖1所示），所以升高溫度時(shí)，其溶解度增大幅度小，降低溫度時(shí)其溶解度減小幅度也小，其晶體析出率太低（

【方法突破1】獲得溶解度隨溫度變化不大的單一熱穩(wěn)定性好的溶質(zhì)（如從NaCl溶液中獲得NaCl）――操作方法：蒸發(fā)結(jié)晶（蒸發(fā)至大部分晶體析出即停止加熱）。

二、蒸發(fā)濃縮、冷卻（降溫）結(jié)晶

如圖1所示，是氯化鈉和硝酸鉀固體的溶解度曲線，硝酸鉀符合大多數(shù)物質(zhì)溶解度變化的普遍規(guī)律，隨溫度升高，溶解度顯著增大（也有個(gè)別反常的，溶解度隨溫度升高而減小的如：Ca（OH）2、Li2CO3等），也即是一條陡峭的曲線?，F(xiàn)在如果只有KNO3水溶液，如何可以得到KNO3晶體？是否也是和NaCl的處理方法相同呢？結(jié)合溶解度曲線可知，操作方法不相同，因?yàn)槠淙芙舛入S溫度升高而增大，溫度較高溫下情況下析出晶體少，因而 KNO3只需要蒸發(fā)濃縮（使其在較高溫度下達(dá)到飽和――此時(shí)會(huì)出現(xiàn)結(jié)晶膜），再冷卻（降溫）結(jié)晶就會(huì)析出大量的晶體（曲線越陡峭，晶體的析出率越高，KNO3通過降溫結(jié)晶析出率高達(dá)90%以上），而不必蒸發(fā)結(jié)晶（那樣會(huì)加熱時(shí)間更久，浪費(fèi)更多燃料和時(shí)間）。這種考查方式比較常見。

【拓展變式】若KNO3晶體含少量雜質(zhì)NaCl ，如何提純？

【思路點(diǎn)撥】像這樣為了進(jìn)一步得到純度更高的某種晶體，我們還要再分別進(jìn)行多次結(jié)晶操作，稱為重結(jié)晶（再結(jié)晶）。其應(yīng)用廣泛，適合分離兩者（或多者）溶解度隨溫度影響變化不同的物質(zhì)的分離（如有機(jī)物中的苯甲酸的重結(jié)晶，2012年廣東高考33題考過等）。故此時(shí)就是重結(jié)晶，具體操作為：將所得KNO3產(chǎn)品溶于適量水，蒸發(fā)濃縮，冷卻結(jié)晶，過濾得濾渣。

【方法突破2】獲得溶解度隨溫度變化大的或易被氧化或易分解或含結(jié)晶水的溶質(zhì)（如：KNO3、FeSO4?7H2O、NH4Cl、CuSO4?5H2O、莫爾鹽【――（NH4）2Fe（SO4）2 ?6H2O】等晶體的獲得）――操作方法：蒸發(fā)濃縮（蒸發(fā)至溶液表面出現(xiàn)結(jié)晶膜即停止加熱）、冷卻結(jié)晶、過濾（若是混合液則還需洗滌）、干燥。

【例1】（2014屆惠州三調(diào)32題節(jié)選）硫酸亞錫（SnSO4）可用于鍍錫工業(yè).某小組設(shè)計(jì)SnSO4制備路線為：

操作Ⅰ是 .

【思路點(diǎn)撥】大多數(shù)物質(zhì)溶解度隨溫度升高而顯著增大，所以題干未給出溶解度曲線或溶解度數(shù)據(jù)的情況下，要獲得晶體則直接采用上面歸納的方法突破2的操作回答即可。

【答案】蒸發(fā)濃縮、冷卻結(jié)晶、過濾、洗滌、干燥。

【誤區(qū)警示】過濾有多種，如低溫過濾、熱過濾、減壓過濾（抽濾――能加快過濾速度）等，請(qǐng)注意區(qū)分；過濾得到的晶體不一定是難溶物，只是在特定溫度下該物質(zhì)達(dá)到過飽和即可析出該晶體；過濾之后是需要獲得濾液還是需要獲得濾渣（晶體），請(qǐng)結(jié)合題意具體問題具體分析，不能形成思維定勢(shì)。

【例2】（2014屆揭陽一中期中考試32題節(jié)選）硫酸鋅的溶解度與溫度之間的關(guān)系如下表：

從硫酸鋅溶液中獲得硫酸鋅晶體的實(shí)驗(yàn)操作為

、 、過濾、干燥。

【思路點(diǎn)撥】注意觀察溶解的的數(shù)據(jù)，不能籠統(tǒng)的回答蒸發(fā)濃縮，應(yīng)該特定的溫度下恒溫蒸發(fā)（因?yàn)?0℃其溶解度最大，再降溫結(jié)晶，晶體析出率最大）。

【答案】60℃條件下蒸發(fā)濃縮、冷卻（降溫）結(jié)晶。

【誤區(qū)警示】蒸發(fā)有多種，如加熱蒸發(fā)、恒溫蒸發(fā)、減壓蒸發(fā)（使其在低溫下快速蒸發(fā)），請(qǐng)注意區(qū)分他們的作用不同，具體問題要具體回答準(zhǔn)確；蒸發(fā)濃縮結(jié)晶（析出晶體，后續(xù)操作是趁熱過濾）與蒸發(fā)濃縮（出現(xiàn)晶膜，后續(xù)操作是冷卻結(jié)晶）蒸發(fā)的具體程度不同，請(qǐng)注意區(qū)別（有時(shí)是題目是籠統(tǒng)描述的不加區(qū)分）。

【變式遷移1】（2014屆廣東六校第二次聯(lián)考32題節(jié)選）工業(yè)上利用廢鐵屑（含少量氧化鋁、氧化鐵等）生產(chǎn)堿式硫酸鐵[Fe（OH）SO4]的工藝流程如下：

減壓蒸發(fā)的原因 ，減壓蒸發(fā)與過濾之間缺哪一步操作 。

【思路點(diǎn)撥】液體的沸點(diǎn)隨壓強(qiáng)增大而增大，壓強(qiáng)減小而減小，故減壓蒸發(fā)的原因可以解釋與該物質(zhì)的水解、穩(wěn)定性等有關(guān)，本題具體分析可知在堿式硫酸鐵中Fe3+是部分水解的，而Fe3+水解程度隨溫度升高而增大。

【答案】使水在較低溫度下蒸發(fā)程度大，而防止Fe3+的水解程度太大生成Fe（OH）3影響產(chǎn)品純度和產(chǎn)量；冷卻結(jié)晶。

【變式遷移2】（2103屆茂名二模32題節(jié)選）工業(yè)利用精煉鎂渣（含有MgO、KCl、MgCl2、BaCl2、CaCl2、FeCl3等雜質(zhì)）回收MgCl2的工業(yè)流程如下：

操作I包含多個(gè)操作，分別為 過濾，洗滌，烘干。烘干時(shí)需要減壓烘干，原因是 。

【思路點(diǎn)撥】第一個(gè)空回答較簡單，是得到含有結(jié)晶水合物，方法自然能答對(duì)結(jié)晶方法；后面烘干的問題解釋要到位，干燥也有多種：烘干（常壓、減壓）、晾干、吹干等。

【答案】蒸發(fā)濃縮，冷卻結(jié)晶；降低烘干時(shí)的溫度，防止MgCl2?6H2O分解（失去結(jié)晶水）。

三、蒸發(fā)濃縮（結(jié)晶）、趁熱過濾

根據(jù)上面圖1所給的NaCl和KNO3的溶解度曲線思考，若溶液中含有大量的NaCl和少量的KNO3，如何從溶液中獲得NaCl晶體呢？這時(shí)很自然想到，蒸發(fā)濃縮時(shí)，NaCl會(huì)先飽和析出晶體（因?yàn)镹aCl占大部分，且其溶解度隨溫度變化不大，而KNO3含量少，且高溫溶解度更大，遠(yuǎn)未達(dá)到飽和），為了防止低溫下KNO3析出，故需趁熱濾即可。單獨(dú)考查這種方式不常見。

【方法突破3】多種溶質(zhì)獲得溶解度隨溫度變化不大或隨溫度升高而減小的（如：大量的NaCl和少量的KNO3混合溶液中獲得NaCl）――操作方法：蒸發(fā)濃縮（蒸發(fā)程度更大，至結(jié)晶析出）、趁熱過濾、洗滌、干燥 。

【例3】（2013屆韶關(guān)一模32題節(jié)選）Na2SO4和Na2SO4?10H2O的溶解度曲線（g/100 g水）如右圖，則Ⅳ中得到Na2SO4固體的操作是：將分離出MnCO3和ZnCO3后的濾液升溫結(jié)晶、 用乙醇洗滌后干燥。用乙醇洗滌而不用水洗的原因是 ；

【點(diǎn)撥】注意溶解度曲線，先低溫下一段增加的是Na2SO4?10H2O的溶解度曲線，后高溫下一段減小的是Na2SO4的溶解度曲線，故這里不能冷卻結(jié)晶，會(huì)得到Na2SO4?10H2O；洗滌劑的選擇注意結(jié)合題意具體分析。

【答案】趁熱過濾；降低Na2SO4的溶解度，減少其在水中溶解而損失，防止形成 Na2SO4?10H2O而引入新雜質(zhì)。

【誤區(qū)警示】過濾之后是否要洗滌，需要看原溶液是單一溶液還是混合溶液（大多是混合溶液）；洗滌的目的就是要洗掉晶體表面（吸附）所含有的少量可溶性的雜質(zhì)（若是晶體內(nèi)部的雜質(zhì)，洗不掉，只能通過重結(jié)晶除去），洗滌試劑選擇要恰當(dāng)，特別是可溶性的晶體則要盡量減少晶體溶解而損失，常用方法有用：冷水、熱水、有機(jī)溶劑、或用該晶體的飽和溶液等來洗滌的，具體需要根據(jù)晶體的溶解性及其他性質(zhì)來選擇。

【變式遷移3】（2014屆江門調(diào)研測(cè)試第32題節(jié)選）已知有關(guān)物質(zhì)的溶解曲線如右圖所示，若要從碳酸鈉溶液中獲得碳酸鈉晶體的操作是 。

【思路點(diǎn)撥】可能部分同學(xué)對(duì)圖像理解不到位，會(huì)錯(cuò)誤的回答：蒸發(fā)濃縮、趁熱過濾，雖然其在40℃溶解度最大，但低溫時(shí)（0℃）溶解度減少顯著，而40-90℃雖減小，但不顯著，故蒸發(fā)濃縮（不必具體答40℃蒸發(fā)濃縮，溫度太低，效果差，升高溫度后溶解度下降不大，而溫度高，蒸發(fā)效果好）、冷卻結(jié)晶、過濾。

【答案】蒸發(fā)濃縮、冷卻結(jié)晶、過濾。

【變式遷移4】（2013屆揭陽華美三模第32題節(jié)選）K2FeO4 在水溶液中易水解：4FeO2-4+10H2O？葑4Fe（OH）3+8OH-+3O2。在“提純”K2FeO4中采用重結(jié)晶、洗滌、低溫烘干的方法，則洗滌劑最好選用 溶液（填序號(hào)）。

A. H2O B. CH3COONa、異丙醇

C. NH4Cl、異丙醇 D. Fe（NO3）3、異丙醇

【思路點(diǎn)撥】根據(jù)相似相溶原理，離子化合物一般在有機(jī)溶劑中的溶解度不大，而一般有機(jī)物在水中溶解度不大，少數(shù)的醇（1-3個(gè)碳原子的醇）、丙酮等具有親水基，與水任意比例互溶，是常用的洗滌劑，它能減少產(chǎn)品溶解而損失，同時(shí)溶解雜質(zhì)，且本身有機(jī)溶劑易揮發(fā)，順便帶走產(chǎn)品中的水分，便于產(chǎn)品晶體的干燥。本題除了考慮溶解性問題外，還需要考慮水解問題。

【答案】B

四、先蒸發(fā)濃縮（結(jié)晶）、趁熱過濾，后冷卻結(jié)晶、過濾

如何從等物質(zhì)的量的NaCl和KNO3混合溶液中分別獲得NaCl和KNO3晶體呢？結(jié)合上面提到的溶解變化規(guī)律可知：要將兩者溶解度隨溫度變化存在顯著差異物質(zhì)分離，關(guān)鍵在于控制溫度。原理是在高溫下析出溶解度小的（此處為NaCl），低溫下同樣析出溶解度小的（此處為KNO3），具體操作為：較高溫下先蒸發(fā)濃縮至析出晶體（這時(shí)析出的絕大多數(shù)是NaCl），再趁熱過濾，然后將濾液再冷卻結(jié)晶（此時(shí)析出的絕大多數(shù)是KNO3）。這種考法也不常見，一定要結(jié)合溶解度曲線具體分析。

【方法突破4】多種溶質(zhì)獲得溶解隨溫度度變化大的以及同時(shí)還要獲得溶解隨溫度度變化小的（或溶解度隨溫度變化規(guī)律相反的兩物質(zhì)）。（如：等物質(zhì)的量的NaCl和KNO3混合溶液中分別獲得NaCl和KNO3）――操作方法：先蒸發(fā)濃縮（結(jié)晶），趁熱過濾，得到溶解度變化小的晶體；再將濾液冷卻結(jié)晶，過濾，得到溶解度變化大的晶體。

【例4】（2009年廣東高考題22題改編）某同學(xué)向飽和MgCl2溶液中加入2倍物質(zhì)的量的飽和NaClO3溶液，請(qǐng)寫出發(fā)生反應(yīng)的化學(xué)方程式為： ；再進(jìn)一步制取Mg（ClO3）2?6H2O的實(shí)驗(yàn)步驟依次為：①蒸發(fā)濃縮結(jié)晶；② ；③ ；④過濾、洗滌?！咎崾荆核姆N化合物的溶解度（S）隨溫度（T）變化曲線如圖所示?！?/p>

【思路點(diǎn)撥】結(jié)合溶解度曲線變化，此時(shí)發(fā)生的反應(yīng)為：MgCl2+2NaClO3=Mg（ClO3）2+2NaCl，注意對(duì)復(fù)分解反應(yīng)的理解不能只停留在初中水平，實(shí)際上只要溶液中離子濃度足夠大，當(dāng)QC>Ksp時(shí)，即可形成沉淀，由本題溶解度曲線可知，四種物質(zhì)中NaCl溶解度最小，即Ksp（NaCl）最小，最先達(dá)到飽和，優(yōu)先沉淀。與此相似的典型實(shí)例就是侯氏制堿法里面應(yīng)用反應(yīng)：NaCl+NH4HClO3=NH4Cl+NaHCO3，與本題原理相同；故分離NaCl和Mg（ClO3）2?6H2O的方法是，蒸發(fā)濃縮結(jié)晶、趁熱過濾（得NaCl）、冷卻結(jié)晶、過濾【得Mg（ClO3）2?6H2O】、洗滌。

【答案】MgCl2+2NaClO3=Mg（ClO3）2+2NaCl；趁熱過濾；冷卻結(jié)晶。

【誤區(qū)警示】一般蒸發(fā)濃縮后的過濾為趁熱過濾，而冷卻結(jié)晶后的過濾不用趁熱過濾。趁熱過濾的目的防止過濾太慢，溶液冷卻而導(dǎo)致溶解度隨溫度變化大的晶體析出，大大降低此時(shí)所得溶解度隨溫度變化小的晶體的純度，并且會(huì)導(dǎo)致下一個(gè)操作――冷卻結(jié)晶所要析出的溶解隨溫度變化大的晶體損失較多。

【變式遷移4】（2013屆廣州二模節(jié)32題選）硼酸（H3BO3）大量應(yīng)用于玻璃制造行業(yè)，以硼鎂礦（含2MgO?B2O3?H2O、SiO2及少量Fe3O4、CaCO3、Al2O3）為原料生產(chǎn)硼酸的工藝流程如下：

已知：H3BO3在20℃、40℃、60℃、100℃時(shí)的溶解度依次為5.0 g、8.7 g、14.8 g、40.2 g。

（1）“浸取”后，采用“熱過濾”的目的是

___________________________。

（2）“母液”可用于回收硫酸鎂，已知硫酸鎂的溶解度隨溫度變化的曲線如圖7所示，且溶液的沸點(diǎn)隨壓強(qiáng)增大而升高。為了從“母液”中充分回收MgSO4?H2O，應(yīng)采取的措施是將“母液”蒸發(fā)濃縮，_____________。

【思路點(diǎn)撥】根據(jù)溶解度的數(shù)據(jù)不難解釋需要趁熱過濾的原因，蒸發(fā)濃縮之后，后續(xù)操作不能思維定式回答冷卻結(jié)晶或趁熱過濾，要結(jié)合題給信息作答。

【答案】（1）防止溫度下降時(shí)H3BO3從溶液中析出 （意思相同即可給分。例如：從H3BO3溶解度數(shù)據(jù)可知，溫度較高時(shí)，H3BO3溶解度較大，不易從溶液中析出。）；（2）加壓升溫結(jié)晶（得分點(diǎn)：加壓2分、升溫或升溫結(jié)晶1分，升溫到180-200℃左右結(jié)晶析出得2分）。

五、在化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的綜合運(yùn)用問題

【例5】（2014屆揭陽市華美模擬題）下表是四種鹽在不同溫度下的溶解度（g/100 g水）：

（假設(shè)：鹽類共存時(shí)不影響各自的溶解度，分離晶體時(shí)，溶劑的損耗忽略不計(jì)）

某同學(xué)設(shè)計(jì)用物質(zhì)的量之比為1∶1的硝酸鈉和氯化鉀為原料，加入一定量的水制取硝酸鉀的實(shí)驗(yàn)，其流程如圖所示：

（1）在①和③的實(shí)驗(yàn)過程中，需要控制的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)條件是________。在上述晶體中________（填“A”或“C”）應(yīng)為硝酸鉀晶體。

（2）在①②的實(shí)驗(yàn)過程中，需要進(jìn)行的操作依次是加水溶解、蒸發(fā)濃縮、_______。

（3）粗產(chǎn)品中往往含有一定的雜質(zhì)，檢驗(yàn)該雜質(zhì)成分中陽離子的具體操作_______。欲將粗產(chǎn)品提純，可采取的方法是 。

（4）為了洗滌所得的硝酸鉀晶體，下列溶劑最佳的洗滌劑的是____（填編號(hào)）。

a. 熱水 b. 冰水 c. 95%的酒精 d. 四氯化碳

（5）如取34.0 g硝酸鈉和29.8 g氯化鉀，加入70 g水，在100 ℃蒸發(fā)掉50 g水，維持該溫度，過濾，析出晶體的質(zhì)量為________。

【思路點(diǎn)撥】本題是將前面所講四個(gè)方面的一個(gè)綜合，注意本題的基本原理是：NaNO3+KCl=KNO3+NaCl（100℃時(shí)），注意結(jié)合表格中溶解的差異，找到某一溫度下，誰的溶解度最小，則前面4個(gè)問題易解決，（5）需要計(jì)算，n（NaNO3）=34.0/85=0.4mol，n（KCl）=29.8/74.5=0.4mol，按照上述計(jì)量1∶1反應(yīng)，理論生成n（NaCl）=0.4mol，100 ℃溶劑還剩20g，溶解的NaCl為39.1/5=7.82，則析出的m（NaCl）=0.4×58.5-7.82=15.58≈15.6g。

【答案】（1）控制溫度；C；（2）趁熱過濾；（3）用潔凈的鉑絲或鐵絲蘸取粗產(chǎn)品在火焰上灼燒，若火焰呈黃色，說明有Na+；重結(jié)晶；（4）c；（5）15.6g。

【變式遷移5】[2013年江蘇高考第19題（5）節(jié)選] 某研究性學(xué)習(xí)小組欲從硫鐵礦燒渣（主要成分為Fe2O3、SiO2、Al2O3 ） 出發(fā)，制備綠礬。請(qǐng)結(jié)合圖9的綠礬溶解度曲線，補(bǔ)充完整由硫鐵礦燒渣制備FeSO4?7H2O晶體的實(shí)驗(yàn)步驟（可選用的試劑：鐵粉、稀硫酸和NaOH溶液）：向一定量燒渣中加入足量的稀硫酸充分反應(yīng) ，

得到FeSO4 溶液， ，得到FeSO4?7H2O 晶體?！靖剑篎e3+、Al3+、Fe以氫氧化物形式開始沉淀的pH分別為1.1、3.0、5.8；完全沉淀時(shí)，溶液的pH分別為3.2、5.0、8.8】

【思路點(diǎn)撥】這是需要具體描述操作過程的，需要進(jìn)行除雜操作，需要結(jié)合題給信息作答。

【答案】 “（過濾，）向反應(yīng)液中加入足量的鐵粉，充分?jǐn)嚢韬?，滴加NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)液的pH約為5，過濾”或“過濾，向?yàn)V液中滴加過量的NaOH溶液，過濾，充分洗滌固體，向固體中加入足量稀硫酸至固體完全溶解，再加入足量的鐵粉，充分?jǐn)嚢韬?，過濾”（滴加稀硫酸酸化，）加熱濃縮得到60℃飽和溶液，冷卻至0℃結(jié)晶，過濾，少量冰水洗滌，低溫干燥。

以上是筆者對(duì)如何蒸發(fā)、如何結(jié)晶、如何過濾、如何洗滌、如何干燥做了一個(gè)全面而系統(tǒng)的闡述，但愿大家通過對(duì)引子、方法突破、例題、變式遷移、思路點(diǎn)撥、誤區(qū)警示等的理解，在今后的考試中能夠靈活運(yùn)用，拿下這個(gè)考點(diǎn)對(duì)應(yīng)的分值。誠然，細(xì)節(jié)決定成敗，我們要有搶分意識(shí)，平時(shí)做到顆粒歸倉，在高考中才會(huì)真正立于不敗之地，共勉之。

篇2

關(guān)鍵詞：中職生 化學(xué)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)意識(shí)

長期以來，化學(xué)實(shí)驗(yàn)不僅是中職教育階段中化學(xué)教學(xué)的重點(diǎn)內(nèi)容，同時(shí)也是中職生學(xué)習(xí)好化學(xué)學(xué)科內(nèi)容的前提條件。實(shí)驗(yàn)意識(shí)是對(duì)學(xué)生對(duì)于化學(xué)實(shí)驗(yàn)的理解程度的現(xiàn)實(shí)反映，也是化學(xué)實(shí)驗(yàn)過程更具備科學(xué)性、代表性的基礎(chǔ)。當(dāng)前，如何才能夠培養(yǎng)中職化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中學(xué)生實(shí)驗(yàn)意識(shí)，已經(jīng)成為當(dāng)前教師心中最為關(guān)切的問題。為此，筆者在文中對(duì)于此問題進(jìn)行分析。

一、中職化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中學(xué)生實(shí)驗(yàn)意識(shí)的培養(yǎng)

教師在開展化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的過程中，全面培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)意識(shí)主要從以下幾個(gè)方面的意識(shí)入手：

（一）學(xué)生對(duì)于具體化學(xué)操作實(shí)驗(yàn)的課前準(zhǔn)備意識(shí)

當(dāng)前階段，大部分的中職生并沒有在初中教育階段自主形成一個(gè)良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣。在實(shí)際化學(xué)實(shí)驗(yàn)操作過程中，經(jīng)常是一邊看著化學(xué)教材，一邊進(jìn)行實(shí)際操作。學(xué)生不小心破壞化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器、浪費(fèi)大量的化學(xué)實(shí)驗(yàn)藥品、操作存在錯(cuò)誤的現(xiàn)象也常常發(fā)生。這一問題產(chǎn)生的原因主要是，由于學(xué)生個(gè)體對(duì)化學(xué)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際操作步驟不熟悉和操作能力的訓(xùn)練不充分，在開始實(shí)驗(yàn)之前又并沒有進(jìn)行一次完整的學(xué)習(xí)，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操做時(shí)，就比較容易出現(xiàn)各種問題。為此，化學(xué)教師在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程時(shí)，必須要重視培養(yǎng)學(xué)生群體的化學(xué)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的準(zhǔn)備意識(shí)。教師需要依據(jù)化學(xué)實(shí)驗(yàn)的目標(biāo)、教材的具體內(nèi)容制定實(shí)驗(yàn)的主題，要求學(xué)生進(jìn)行課前預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)教材和實(shí)際操作流程，學(xué)生在課前預(yù)習(xí)中已經(jīng)初步了解化學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，并充分了解實(shí)驗(yàn)中基本的原理、操作方法、實(shí)驗(yàn)裝置步驟和實(shí)驗(yàn)中需要注意的事項(xiàng)。學(xué)生在準(zhǔn)備過程中精簡的做出實(shí)驗(yàn)記錄，為課堂中實(shí)際操作化學(xué)實(shí)驗(yàn)打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，以此來不斷強(qiáng)化學(xué)生化學(xué)實(shí)驗(yàn)課前準(zhǔn)備的意識(shí)。

（二）在進(jìn)行實(shí)際操作過程中，教師需要時(shí)刻規(guī)范學(xué)生的正確操作行為意識(shí)

學(xué)生精湛的化學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?，最主要是源于學(xué)生對(duì)于實(shí)驗(yàn)基本操作能力的培養(yǎng)，而實(shí)驗(yàn)?zāi)芰τ质墙?jīng)過學(xué)生不斷反復(fù)練習(xí)實(shí)驗(yàn)而得到的。如果中職生無法真正掌握實(shí)驗(yàn)中試管、燒瓶等相關(guān)的常用儀器的基本使用方法，就無法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。全面透徹地了解實(shí)驗(yàn)中各種儀器的使用原理和操作流程是培養(yǎng)學(xué)生實(shí)際化學(xué)實(shí)驗(yàn)操作能力的基礎(chǔ)。在進(jìn)行實(shí)際操作的過程中，教師需要尤其重視學(xué)生在進(jìn)行化學(xué)實(shí)驗(yàn)操作的規(guī)范性，從最基礎(chǔ)的固體藥品取用、滴管使用順序、液體的傾倒手法、用量具量取液體的步驟、再到學(xué)生自主給試管里的固態(tài)物質(zhì)加熱實(shí)驗(yàn)、自主完成檢查裝置氣密性等實(shí)驗(yàn)。教師可以通過親身示范、實(shí)驗(yàn)步驟的具體細(xì)化、反復(fù)的操作指導(dǎo)，不斷糾正學(xué)生的錯(cuò)誤行為，使學(xué)生可以逐漸形成自我化學(xué)實(shí)驗(yàn)的規(guī)范化要求，逐漸養(yǎng)成正確實(shí)驗(yàn)操作行為習(xí)慣，為未來復(fù)雜繁瑣的化學(xué)實(shí)驗(yàn)操作打下堅(jiān)實(shí)的物質(zhì)基礎(chǔ)。

（三）化學(xué)實(shí)驗(yàn)操作過程中，重視化學(xué)實(shí)驗(yàn)中學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)培養(yǎng)

在化學(xué)學(xué)科教學(xué)內(nèi)容開設(shè)化學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，不僅只是要求學(xué)生可以簡單的掌握化學(xué)實(shí)驗(yàn)的具體操作流程，而是需要學(xué)生在已經(jīng)理解并掌握這些具體的實(shí)驗(yàn)知識(shí)理論的基礎(chǔ)上進(jìn)行自我大膽的創(chuàng)新創(chuàng)造。為此，教師需要在教學(xué)過程中，不斷培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)自我創(chuàng)新意識(shí)。教師要求中職生對(duì)化學(xué)教材中所講的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容全部掌握，隨后對(duì)其進(jìn)行大膽的突破創(chuàng)新，尋找出可以更加高效化完成實(shí)驗(yàn)的方法。例如，氫氧化亞鐵這一物質(zhì)自身比較容易被氧化，也因?yàn)檫@一特性人們很難以對(duì)其進(jìn)行制取。中職生大多數(shù)都思維比較機(jī)動(dòng)靈活，教師只需要進(jìn)一步知識(shí)引導(dǎo)就可以充分激發(fā)出學(xué)生們無盡創(chuàng)造力。學(xué)生對(duì)于日常生活中新鮮的事物，玄妙的化學(xué)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象充滿好奇，教師需要啟發(fā)學(xué)生對(duì)其進(jìn)行深入的分析研究，并合理恰當(dāng)?shù)倪\(yùn)用實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行進(jìn)一步的考證。當(dāng)學(xué)生逐漸形成實(shí)驗(yàn)意識(shí)后，教師需要在課堂教學(xué)中設(shè)置一部分實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新內(nèi)容，由學(xué)生進(jìn)行自主的學(xué)習(xí)討論并給出實(shí)驗(yàn)的具體步驟。逐漸的加強(qiáng)學(xué)生實(shí)際實(shí)驗(yàn)操作的分析和解決問題的能力，全面培養(yǎng)學(xué)生的專業(yè)實(shí)驗(yàn)素養(yǎng)。

（四）教師需要培養(yǎng)學(xué)生實(shí)際實(shí)驗(yàn)分析的能力，進(jìn)一步精準(zhǔn)地把握實(shí)驗(yàn)的最終要求

當(dāng)前階段，教師在進(jìn)行實(shí)際分析實(shí)驗(yàn)操作過程中，為了可以使學(xué)生理解的快、學(xué)習(xí)的好、記憶的牢，教師可以將具體實(shí)驗(yàn)步驟全部編制出一系列的口號(hào)或者是字詞。這樣一來，不僅可以加深學(xué)生的學(xué)習(xí)印象，還可以極大地提高學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣。例如，教師在教學(xué)“配制一定體積的摩爾濃度溶液”這一課程時(shí)，在具體實(shí)驗(yàn)分析和演示的前提條件下，教師逐漸歸納出：稱（對(duì)于固態(tài)的溶質(zhì)需要用稱，液態(tài)溶質(zhì)需要用量）、溶（溶解的縮寫）、洗（洗滌的簡稱）、稀（稀釋操作的簡寫）這四字的配制法。大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，學(xué)生可以自主依據(jù)實(shí)驗(yàn)的主題、操作的流程、獨(dú)立地完成實(shí)驗(yàn)的操作活動(dòng)，同時(shí)還會(huì)進(jìn)一步提出自己的一些實(shí)驗(yàn)改進(jìn)想法。通過學(xué)生的大膽創(chuàng)新，不僅加深了自身對(duì)于化學(xué)實(shí)驗(yàn)知識(shí)內(nèi)容的理解，還增加了學(xué)習(xí)的自信心，進(jìn)一步提高了課堂實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量。

二、結(jié)束語

總而言之，在中職教育階段中化學(xué)教師必須要在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)的過程中，不斷培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)意識(shí)。通過不斷加深學(xué)生的實(shí)驗(yàn)意識(shí)，不僅有利于提高學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性，還有利于學(xué)生課題理解并掌握化學(xué)實(shí)驗(yàn)操作的能力，從根本上提高化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的教學(xué)質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)：

篇3

[關(guān)鍵詞]紙張；熒光增白劑；危害；檢測(cè)方法

中圖分類號(hào)：TS77 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-914X（2016）15-0342-01

近年來，關(guān)于熒光增白劑超標(biāo)的報(bào)道時(shí)常見諸報(bào)端，衣服、洗衣液和唇膏等生活用品中含有大量的熒光增白劑，其中尤以生活用紙為甚。熒光增白劑的過量使用讓消費(fèi)者對(duì)紙張的安全性產(chǎn)生了質(zhì)疑，那么熒光增白劑的危害何在，我們又如何對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)呢？下面，就對(duì)此進(jìn)行詳細(xì)的探討。

一、紙張熒光增白劑危害

熒光增白劑又被稱之為白色染料，是一種常見的熒光染料有機(jī)化合物。熒光增白劑的作用在于讓染色物體在光照下呈現(xiàn)出閃閃發(fā)光的熒光效應(yīng)，以起到紙張?jiān)霭椎男Ч?。由于熒光增白劑的使用相?duì)其他造紙工藝能明顯增加紙張白度，且成本低廉，因此被廣泛的用于餐巾紙、作業(yè)本、濕巾等生活用紙中。

我國對(duì)于紙張熒光增白劑的添加沒有嚴(yán)格限制，在部分紙張中是允許進(jìn)行添加的。熒光增白的種類繁多，紙張?zhí)砑拥闹饕嵌揭蚁┗筋悷晒庠霭讋．?dāng)前，社會(huì)各界對(duì)紙張熒光在光毒性、刺激性、致癌性等方面的評(píng)價(jià)存在一定爭(zhēng)議。但是，據(jù)科學(xué)研究表明，當(dāng)人體吸收過量的熒光增白劑后，熒光增白劑就會(huì)聚集在體內(nèi)，且不易被分解，而且一旦與人體蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)之后，就只能通過肝臟酵素進(jìn)行分解，增加肝臟的壓力[1]。此外，一旦人體傷口接觸了熒光增白劑，就會(huì)延緩傷口愈合能力，增加健康隱患。但是，還有科學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，上述種種現(xiàn)象在動(dòng)物身上不會(huì)產(chǎn)生任何影響?？偟膩碚f，國內(nèi)外還并沒有確切的證據(jù)表明熒光增白劑的毒害作用和危害大小，生產(chǎn)廠商只要合理控制熒光劑的添加，確實(shí)會(huì)給人們帶來視覺美感。

二、紙張熒光增白劑常見檢測(cè)技術(shù)

（一）紫外燈照射觀測(cè)法

紫外燈照射觀察法的原理在于，熒光增白劑能夠反射可見光并吸收紫外光，并將吸收的紫外光能量反射成為可見的藍(lán)紫色熒光，是紙張熒光增白劑檢測(cè)最常使用的一種檢測(cè)技術(shù)，紫外燈照射下，僅憑肉眼即可觀察到樣品表面的熒光顏色。具體操作方法如下：在陰暗避光的室內(nèi)，分別用254和356nm的紫外燈對(duì)紙張樣品進(jìn)行照射，觀察紙張樣品表面是否呈現(xiàn)藍(lán)紫色熒光，同時(shí)利用數(shù)碼相機(jī)對(duì)看到的顏色進(jìn)行拍照保存。在我國，紫外燈照射觀察法除了用于紙張熒光增白劑檢測(cè)外，還被用于食用菌的檢測(cè)，利用陰陽性對(duì)比法對(duì)食用菌的熒光增白劑進(jìn)行檢測(cè)。在紙張檢測(cè)中，需要從樣品內(nèi)隨機(jī)抽取不少于5張50cm2以上的紙樣，如果任何一張紙樣當(dāng)中藍(lán)紫色熒光面積超過2cm2，即可判定此批紙品為不合格。紫外燈照射觀測(cè)法操作簡單，無需精細(xì)檢測(cè)儀器，在普通實(shí)驗(yàn)室內(nèi)即可完成，技術(shù)要求性不高。但是，紫外燈照射觀測(cè)法不能準(zhǔn)確定量，更無法鑒定紙張熒光增白劑的具體類型，如果取樣不均，檢測(cè)結(jié)果就會(huì)出現(xiàn)較大的誤差。

（二）白度檢測(cè)法

所謂白度檢測(cè)法主要是利用白度測(cè)定儀對(duì)紙張的白度進(jìn)行檢驗(yàn)測(cè)定。白度檢測(cè)儀當(dāng)中的積分球能夠測(cè)量紙張的絕對(duì)光譜漫反射率，根據(jù)測(cè)量數(shù)據(jù)判定紙張當(dāng)中的熒光增白劑含量，即紙張白度。郭仁宏等科學(xué)家利用白度法對(duì)生活用紙熒光增白劑的遷移性進(jìn)行了檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，即以1.0%為標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)檢測(cè)數(shù)值≥1.0%時(shí)，判定樣品熒光增白劑含量超標(biāo)，當(dāng)檢測(cè)數(shù)值

雖然白度檢測(cè)法操作簡單，但是在紙張熒光增白劑的檢測(cè)當(dāng)中的應(yīng)用并不廣泛，主要原因在于該檢測(cè)方法受到設(shè)備因素和人為因素的影響較大，尤其在面對(duì)成分復(fù)雜的紙張樣品時(shí)，檢測(cè)的準(zhǔn)確性難以得到保障。再加上我國對(duì)紙張熒光增白劑白度檢測(cè)法的指標(biāo)尚未統(tǒng)一，因此執(zhí)法監(jiān)督部門很少用此方法進(jìn)行檢測(cè)。

（三）HPLC法

HPLC法即高效液相色譜法，HPLC法分離范圍廣，檢測(cè)準(zhǔn)確度高。HPLC法的分離原理為同一物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相時(shí)的分配系數(shù)不同，HPLC是目前相對(duì)成熟的紙張熒光增白劑檢測(cè)技術(shù)之一，也是最常使用的檢測(cè)手段。由于流動(dòng)相和色譜柱填料的差異，HPLC的分離模式有很多種，并且由于被檢測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)差異，檢測(cè)的儀器也并不固定[3]。

HPLC法檢測(cè)效果好、分離范圍廣、操作便捷，且自動(dòng)化程度非常高。除了用于紙張檢測(cè)外，HPLC法還被廣泛用于食品、農(nóng)產(chǎn)品、洗滌劑和食品包裝的熒光增白劑檢測(cè)，其中又以反向分離模式最為常見，熒光檢測(cè)的利用可以提高檢測(cè)靈敏度，進(jìn)而降低檢出限，非常適合用于帶檢測(cè)成分較為復(fù)雜的產(chǎn)品當(dāng)中。

（四）熒光白度法

熒光白度法和白度法的區(qū)別在于，熒光白度法使用白度計(jì)而白度法使用白度測(cè)定儀。熒光白度檢測(cè)法的具體操縱步驟為，將樣紙裁剪成固定尺寸后放置于白度計(jì)探頭之上，然后分別記錄紫外插板推入和拔出時(shí)測(cè)定紙樣的藍(lán)光漫反射因數(shù)R457和紫外截止后的紙樣藍(lán)光漫反射因數(shù)Rc，將R457和Rc相減后乘以B（熒光亮度定標(biāo)引自），得到的數(shù)值即為樣品的熒光白度F。當(dāng)前，在熒光白度指標(biāo)F值判定紙張熒光增白劑含量上的標(biāo)準(zhǔn)尚未統(tǒng)一，依據(jù)檢測(cè)設(shè)備的不同，熒光白度標(biāo)準(zhǔn)值F在1%到6%之間不等。

（五）紫外分光光度法

紫外分光光度法的原理為利用物質(zhì)吸收200nm至760nm電磁波波長的特性，進(jìn)而建立起來的簡單定性定量分析檢測(cè)法。董仲生等人曾采用紫外分光光度法對(duì)Fluorescent brightener 71進(jìn)行了測(cè)定，將Fluorescent brightener 71樣品稀釋后，在350nm電磁波之下測(cè)定其吸光度，并用0.4g/L的NaOH溶液進(jìn)行對(duì)比，檢測(cè)結(jié)果表明，F(xiàn)luorescent brightener 71樣品在稀釋后應(yīng)當(dāng)立即進(jìn)行檢測(cè)，長時(shí)間放置會(huì)因樣品吸光而影響檢測(cè)精度。此外，董仲生等人還利用此方法進(jìn)行了Fluorescent brightener210和Fluorescent brightener ER-II的檢測(cè)。上述檢測(cè)主要是針對(duì)于熒光增白劑的純品檢測(cè)，而姜莉等研究人員曾利用紫外分度光度法對(duì)紙張當(dāng)中的熒光增白劑BBU進(jìn)行檢測(cè)，在隨機(jī)抽取的樣品中，質(zhì)量濃度在0.2mg/mL范圍以內(nèi)，線性相關(guān)值約為0.998。

紫外分光光度法用于紙張熒光增白劑的檢測(cè)具有速度快、便于操作等優(yōu)勢(shì)，但是必須嚴(yán)格控制好檢測(cè)時(shí)間，否則樣品會(huì)因受到光照而發(fā)生內(nèi)在構(gòu)造的轉(zhuǎn)換。除此之外，紫外分光光度檢測(cè)法僅能檢測(cè)紙張當(dāng)中的熒光增白劑含量，對(duì)于熒光增白劑的種類同樣不能進(jìn)行測(cè)定。

三、結(jié)語

除了上述檢測(cè)方法之外，還包括液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、毛細(xì)管電泳法、薄層析法等。當(dāng)前，熒光增白劑的品種繁多，僅從染料索引上看，進(jìn)行登記的就有400余種，包括常用的Fluorescent brightener 0b-1、127、199、4bk......此外，未進(jìn)行登記的熒光增白劑也不在少數(shù)。其中，部分常用熒光增白劑經(jīng)過毒理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，確認(rèn)基本無毒或低毒，但依然存在大量的品種未進(jìn)行毒理實(shí)驗(yàn)，所以其毒性未知。而無論是國際上還是國內(nèi)，都未曾對(duì)熒光增白劑的類型進(jìn)行嚴(yán)格劃分，檢測(cè)方法和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)也尚未統(tǒng)一，并且都不能很好的判斷熒光增白劑的類型。因此，進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)紙張熒光增白劑檢測(cè)方法的研究，嚴(yán)格限制熒光增白劑的用量，是是未來發(fā)展的重要方向。

參考文獻(xiàn)

[1] 沈霞，肖建芳，章若紅.紙張中熒光增白劑的探討[J]. 華東紙業(yè)，2013，（03）：35-37+41.

[2] 張翠.制漿造紙過程中幾個(gè)重要參數(shù)的快速檢測(cè)方法的研究[D].華南理工大學(xué)，2011.

[3] 許英健，史曉凡. 高效液相色譜――熒光檢測(cè)法分析無碳復(fù)寫紙[A]. 中國化學(xué)會(huì).第五屆全國“公共安全領(lǐng)域中的化學(xué)問題”暨第三屆危險(xiǎn)物質(zhì)與安全應(yīng)急技術(shù)研討會(huì)論文集[C].中國化學(xué)會(huì)：，2015：5.

篇4

[關(guān)鍵詞] 丙型肝炎病毒；基因型分布；1 b基因；溫州

[中圖分類號(hào)] R512.63 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2014）01（c）-0058-03

Distribution characteristics and its clinical significance of hepatitis C virus infection genotype in Wenzhou City

LIN Rong WANG Bin LIU Yanfei

Center Blood Station in Wenzhou City， Zhejiang Province， Wenzhou 325000， China

[Abstract] Objective To study the distribution characteristics and its clinical significance of hepatitis C virus （HCV） infection genotype in Wenzhou City. Methods 244 cases of voluntary blood donors in Center Blood Stations in Wenzhou City from January 2010 to December 2012 were selected， in which there were 122 cases of HCV infection confirmed by ELISA， and 122 cases of health body， at the same time 122 cases of hepatopath in Outpatient Clinic of a hospital in Wenzhou City were collected. All objects were all given venous blood sampling， HCV RNA was extracted， AMV was reversed， the nested PCR amplification was used for HCV-RNA and genotyping detection. Results Among all cases of the object of study， 1 b total positive rate in hepatopath was 100.0%， and was 95.9% in voluntary blood donors with HCV antibody positive， and was 0.0% in health voluntary blood donors， the comparison had significant difference （χ2=10.28，P < 0.05）. The proportion of type 1 b among 122 hepatopath was the highest， which was the highest in severe and cirrhosis of the liver （P < 0.05）， the comparison between different degrees was statistically significant （P < 0.05）. Conclusion 1 b type of HCV genotypes in Wenzhou City is high， the disease is more serious caused by 1 b infection.

[Key words] Hepatitis C virus （HCV）； Genotype distribution； 1 b gene； Wenzhou City

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）是黃病毒科肝炎病毒，為RNA正鏈病毒[1]。鑒于HCV基因組的變異性較大，故HCV存在不同的基因型。目前，根據(jù)Simmonds分型系統(tǒng)共有6個(gè)基因型，68個(gè)亞型。我國主要以1a、1b、2a、2b、3a基因型為主，且均有相關(guān)報(bào)道文獻(xiàn)[2]。我國HCV感染率較高，平均為3.2%，該類感染可導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化、肝癌等病癥，其臨床癥狀的輕重程度與感染基因型相關(guān)，一般1b型較非1b型肝功能損害病情嚴(yán)重，易惡化[3-5]。因此，對(duì)HCV感染區(qū)分基因分型對(duì)于丙型肝炎的個(gè)體化治療作用明顯。本研究采用PCR技術(shù)對(duì)溫州地區(qū)HCV感染者進(jìn)行基因型研究，了解本地區(qū)患者主要基因型，以探討HCV基因型的分布特征，并分析基因型與病情的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月～2012年12月溫州市中心血站（以下簡稱“我站”）自愿獻(xiàn)血者244例，經(jīng)ELISA方法證實(shí)HCV抗體陽性者122例，年齡23～56歲，其中男68例，女54例；健康者122例，年齡20～58歲，其中男70例，女52例。收集同期溫州某醫(yī)院門診患者122例，其中，輸血后丙肝14例，男4例，女10例，年齡15～64歲；散發(fā)性丙肝25例，男15例，女10例，年齡17～60歲；肝硬化40例，男27例，女13例，年齡11～69歲；原發(fā)性肝癌43例，男21倒，女22例，年齡23～68歲。采集靜脈血，全部血清標(biāo)本均來自我站檢驗(yàn)科及醫(yī)院門診患者。所有患者診斷均符合2000年9月西安第10次全國傳染病與寄生蟲病和肝病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的《病毒性肝炎防治方案》的標(biāo)準(zhǔn)：血清抗-HCV陽性、HCV RNA>80 copies/mL，伴或不伴肝功能異常，均伴有不同程度的肝硬化。兩組研究對(duì)象年齡、性別比例等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。且研究對(duì)象均知情同意，已經(jīng)我站業(yè)務(wù)科通過。

1.2 試劑

全血RNA提取試劑盒（北京艾比根生物技術(shù)有限公司）；HCV抗體診斷試劑盒（北京科美東雅生物技術(shù)有限公司）；Taq酶、引物、RNA酶抑制劑（上海玉博生物科技有限公司）；M-MuLV逆轉(zhuǎn)錄酶（Simga公司）。

1.3 方法

1.3.1 PCR引物設(shè)計(jì) 自Genebank中查找HCV 1a、1b、2b、3a型全序列，查找各型5′ UTR區(qū)共同序列，并以此自行設(shè)計(jì)引物。外引物：S1（nt34～54）：5′-ATCACTCCCCTGTGAGGAAC-3′；S2（nt279～299）：5′-CCCTATCAGGCAGTACCACA-3′；內(nèi)引物：S3（nt39～59）：5′-TCCCCTGTGAGGAACTACTG-3′；S4（nt274～294）：5′-TCAGGCAGTACCACAAGGCC-3′。

1.3.2 HCV RNA提取及AMV反轉(zhuǎn)錄 所收集的血清，12 000 r/min離心10 min，取上清，-70℃冰箱保存?zhèn)溆?。利用Trizol法提取備用血清中的病毒RNA，具體操作方法為：于30 μL血清中加入Trizol溶液、氯仿及異丙醇，預(yù)冷振蕩并洗滌，所得RNA于-70℃超低溫冰箱中保存?zhèn)溆?。另外在EP管中依次加入模板RNA、oligo（dT）16、dNTPmixture、RNase Inhibitor、AMV及DEPC水，混勻均勻，42℃保溫1 h，95℃保溫5 min后冰上冷卻后，行反轉(zhuǎn)錄。

1.3.3 巢式PCR擴(kuò)增和酶切反應(yīng) 于EP管中分別加入cDNA模板，Taq DNA聚合酶，10×PCR buffer，上游引物（25 mmol/L）、下游引物1μL，dNTP，滅菌去離子水，行擴(kuò)增，并于95℃預(yù)變性4 min，95℃變性30 s，55℃退火30 s，70℃延伸30 s，70℃延伸5 min，進(jìn)行35個(gè)循環(huán)后得到第1輪擴(kuò)增產(chǎn)物。以其為模板，等同條件下行第2輪擴(kuò)增。取第2輪PCR產(chǎn)物，分別加入19.5 μL Hae Ⅲ和Bsh 1236Ⅰ及buffer溶液，37℃水浴2 h，2%瓊脂糖凝膠電泳鑒定結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RT-巢式PCR檢測(cè)HCV-RNA結(jié)果

1b陽性（144 bp）、2a陰性表達(dá)；1b陰性、2a陽性（174 bp）表達(dá)；1b陽性（144 bp）、2a陽性（174 bp）表達(dá)，見圖1。

從左至右分別為1b陽性（144 bp）、2a陰性，1b陰性、2a陽性（174 bp），Marker（從上至下分別為100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500 bp），1b陽性（144bp）、2a陽性（174bp）

圖1 溫州地區(qū)HCV分型凝膠電泳圖

2.2 HCV-RNA基因分型結(jié)果

結(jié)果顯示，所有研究對(duì)象中，門診肝病患者1b總陽性率為100.0%，HCV抗體陽性者1b總陽性率為95.9%，健康者1b總陽性率為0.0%，三者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.28，P < 0.05），提示該地區(qū)1b基因型所占比例較大。見表1。

2.3 基因型與患者病情的關(guān)系

以門診患者不同病變程度占比進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示，122例患者中1b型所占比例最高，且主要分布在重度病變及肝硬化患者中（P < 0.05），不同程度間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。提示1b型感染所致疾病病情較為嚴(yán)重。見表2。

表2 基因型與患者病情的關(guān)系

3 討論

HCV基因組變異明顯，分型較多，平均每個(gè)位點(diǎn)的核苷酸變異頻率每年可達(dá)0.001[6-7]。HCV不同基因型可影響患者的病情及其進(jìn)展。本研究利用較為保守的5′ UTR區(qū)進(jìn)行RFLP法分型，對(duì)1a～6a不同基因型的cDNA擴(kuò)增效果較為明顯。不同地區(qū)的HCV基因分布不同，歐美國家主要為1a型，亞洲國家主要為1b型[8]。文獻(xiàn)顯示，1b基因型對(duì)疾病的影響較為嚴(yán)重，可導(dǎo)致肝壞死及纖維化，且該類病毒的復(fù)制能力較強(qiáng)，危險(xiǎn)系數(shù)較大[9]。

HCV基因型分布存在地區(qū)差異。研究報(bào)道我國南方沿海城市1b型占90%以上，北方城市2a型占62%左右[10-11]。HCV包括多種基因型，將Okamoto和Simmonds提出的兩種分類方法結(jié)合起來可以把HCV基因型分為Ⅰ/1a、Ⅱ/1b、Ⅲ/2a、Ⅳ/2b、Ⅴ/3a、4a、4b、4c、4d、5a 和Ⅵ/6a，其中Ⅱ/1b和Ⅲ/2a是我國主要流行的基因型。人感染HCV后機(jī)體不產(chǎn)生保護(hù)性抗體，另外針對(duì)HCV感染也缺少有效的治療藥物。雖然干擾素是目前公認(rèn)的抗HCV的有效藥物，但是，國內(nèi)外的研究資料表明，HCV基因型對(duì)干擾素有明顯影響[7-8]。因此，在干擾素治療前，提前測(cè)定患者所感染HCV的基因型對(duì)于治療非常重要。另外，人感染HCV以后，肝臟疾病的嚴(yán)重程度也各異，這與所感染的HCV基因型也有關(guān)，所以研究HCV不同血清型在人群中分布情況可以為HCV的診斷和治療等方面提供重要的科學(xué)依據(jù)。我國其他地區(qū)雖然進(jìn)行了HCV基因型分布的探討，但是在溫州地區(qū)還未開展。關(guān)于浙江溫州地區(qū)HCV不同基因型分布情況相關(guān)的研究不多。本研究結(jié)果顯示，所有研究對(duì)象中，門診肝病患者1b型總陽性率為100.0%，HCV抗體陽性者1b型總陽性率為95.9%，健康者1b型總陽性率為0.0%，三者比較，差異顯著（P < 0.05），提示該地區(qū)1b型所占比例較大。122例肝病患者中1b型所占比例最高，且主要分布在重度病變及肝硬化患者中（P < 0.05），不同程度間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。提示，1b型有較高的復(fù)制能力和血清反應(yīng)性，較強(qiáng)的肝細(xì)胞損害作用及較低的IFN治療反應(yīng)性等，由其感染所致疾病病情較為嚴(yán)重，HCV基因型與特定的組織病理學(xué)程度、肝臟炎癥程度相關(guān)。

綜上所述，本研究在一定程度上反映了溫州地區(qū)HCV基因型分布情況，對(duì)當(dāng)?shù)乇透窝谆颊叩闹委熀皖A(yù)后判斷有一定的指導(dǎo)意義。但由于本研究對(duì)象例數(shù)不多，還不能完全反映溫州地區(qū)HCV不同基因型具體分布情況，且研究對(duì)象以慢性肝病為主，缺乏無癥狀患者，有必要擴(kuò)大樣本量，選擇人群資料進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 萬祥輝，曾照芳，楊細(xì)媚，等.丙型肝炎病毒基因分型及core蛋白區(qū)的分子演化分析[J].生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展，2008，35（8）：964-968.

[2] 王琰，朱新宇，王霞，等.太原地區(qū)丙型肝炎病毒基因分型及其臨床意義[J].實(shí)用肝臟病雜志，2010，13（2）：109-111.

[3] García A，F(xiàn)eng Y，Parry NM，et al. Helicobacter pylori infection does not promote hepatocellular cancer in a transgenic mouse model of hepatitis C virus pathogenesis[J]. Gut Microbes，2013，4（6）：1123-1134.

[4] Paracha UZ，F(xiàn)atima K，Alqahtani M，et al. Oxidative stress and hepatitis C virus [J]. Virol J，2013，10（1）：251.

[5] 陳嘉.維持性血液透析患者感染丙型肝炎病毒基因分型特點(diǎn)及意義[J].中國血液凈化，2013，12（5）：282-286.

[6] Lacombe K，Valin N，Stitou H，et al. Efficacy and tolerance of telaprevir in HIV-hepatitis C virus genotype 1-coinfected patients failing previous antihepatitis C virus therapy：24-week results [J]. AIDS，2013，27（8）：1356-1359.

[7] Chemaitelly H，Abu-Raddad LJ，Miller FD. An Apparent Lack of Epidemiologic Association between Hepatitis C Virus Knowledge and the Prevalence of Hepatitis C Infection in a National Survey in Egypt [J]. PLoS One，2013，8（7）：69803.

[8] 王平忠，周永興.西安地區(qū)丙型肝炎病毒基因分型研究[J].世界華人消化雜志，1999，7（9）：757-759.

[9] 許可，鄧小昭，丁偉良，等.江蘇省宜興地區(qū)丙型肝炎病毒基因分型研究[J].中華流行病學(xué)雜志，2005，26（11）：901-903.

[10] 由莉越，周婷婷，遲淑萍，等.基于數(shù)據(jù)挖掘的丙型肝炎患者氨基酸序列與TNF-α間的規(guī)律性研究[J].北京生物醫(yī)學(xué)工程，2012，31（4）：422-424，428.